白蛋白检测试剂盒(溴甲酚紫比色法)
产品简介:
总蛋白(Total Protein,TP)由白蛋白和球蛋白组成,检测白蛋白的方法有双缩脲法、色氨酸法、染料结合法。检测白蛋白的染料结合法可采用溴甲酚绿或溴甲酚紫染料结合,上述染料对白蛋白具有高度的亲和力,通常监测染料与白蛋白结合的初速率,该速率与样品中白蛋白浓度成正比。
Leagene白蛋白检测试剂盒(溴甲酚紫比色法)检测原理是在酸性环境下,白蛋白分子带正电荷,与带负电荷的溴甲酚紫(Bromocresol purple,BCP)结合生成绿色复合物,在603nm处有吸收波,该复合物的吸光度与白蛋白浓度成正比,与同样处理的白蛋白标准比较,求得待测样品中白蛋白浓度。本试剂盒多用于人或动物血清、血浆、组织等样本中的蛋白含量测定,该法操作简单、方法特异,既可手工操作,又可采用自动分析仪检测,对血清清蛋白的特异性比BCG法(溴甲酚绿法)要好,不易受时间和温度变化的影响。本试剂盒仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。
产品组成:
编号
名称
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TC0567
100T
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Storage
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试剂(A): BCP试剂
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200ml
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4℃ 避光
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试剂(B): 白蛋白标准
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20mg
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RT
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试剂(C): 白蛋白标准配制液
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100ml
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RT
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使用说明书
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1份
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自备材料:
离心管、小试管
比色杯
分光光度计
操作步骤(仅供参考):
取0.5ml白蛋白标准配制液或稀释液加入到白蛋白标准中,充分溶解后配制成40mg/ml的白蛋白标准溶液,配制后可立即使用,溶解后的白蛋白标准溶液应-20℃保存。亦可按自己试验要求继续进行稀释,如稀释至1mg/ml。特别提示:待测蛋白溶解于什么样的稀释液中,白蛋白标准也宜溶解于什么样的稀释液中。例如待测蛋白溶解于蔗糖中,亦取白蛋白标准溶解于蔗糖中。一般也可以用0.9%NaCl或PBS作为溶解白蛋白标准品的稀释液。
样本处理:血清、血浆样本直接取10μl检测。对于组织样本,按组织质量(g):生理盐水=1:9比例,加入9倍体积的生理盐水或PBS,冰浴下匀浆后,2500g离心10min,取10μl上清待检。
白蛋白加样操作,按下表依次加入试剂:
加入物(ml)
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空白管
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标准管
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待测管
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白蛋白标准配制液
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0.01
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−
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−
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白蛋白标准溶液(40mg/ml)
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−
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0.01
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−
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待检样品(血清、血浆、组织匀浆液)
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−
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−
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0.01
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BCP试剂
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2.0
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2.0
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2.0
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比色杯光径1.0cm,先在分光光度计603nm处以空白管调零,逐管加入BCP试剂,并立即混匀。
放置(30±3)s,读取标准管和各待测管的吸光度。
当遇到脂血混浊,可设”样本空白管”:取0.01ml待测样品加入2.0ml白蛋白标准配制液,予以校正。
计算:
白蛋白(g/L)=(待测管吸光度/标准管吸光度)×白蛋白标准液浓度(g/L)
参考区间:
注意事项:
1、 白蛋白标准粉末溶解于白蛋白标准配制液后,即获得白蛋白标准原液,该原液中含有防腐剂,不影响后续检测,该蛋白标准原液-20℃长期保存。
2、 如果没有分光光度计,也可以使用酶标仪测定。使用酶标仪测定蛋白浓度时,每个试剂盒可以测定的样品数量可能会显著增加。
3、 本法线性范围是10~50g/L,在10~40g/L呈良好线性范围。
4、 CV可达0.45%,回收率可达99.3%~102%,平均回收率达100.5%。
5、 该法测定正常样本的批间变异系数为6.3%。
有效期: 6个月有效。白蛋白标准配制成溶液后应-20℃冻存。