溶壁酶使用说明书 货号:BD-Lywallzyme 01 英文名称:Lywallzyme 其他名称:真菌细胞壁溶解酶 酶活性:原生质体产率≥1.0×106 个/mL酶性状:灰白色或浅棕色粉末,易溶于水,活性稳定,较耐高温,便于贮存,产品质量稳定。 适用范围:酶解真菌细胞壁。对大多数真菌都有较好的脱壁效果,对担子菌和子囊菌的效果*佳。其中食用和药用真菌,如草菇、平菇、蘑菇、香菇、银耳和灵芝等;工农业生产上的重要菌种,如产黄青霉、黑曲霉、酵母等;研究遗传用的重要材料,如裂褶菌、粗糙脉孢菌、构槽曲霉等,都能用溶壁酶去壁,获得大量原生质体,分离的原生质体活性强,有再生能力。用途:分解真菌细胞壁,可获得高产、优质的原生质体。该酶是真菌生物工程研究的有效工具酶 保存方法:3 个月以内:4℃干燥保存;3 个月以上:-20℃干燥保存。包装规格:1 克/瓶 溶壁酶酶解真菌菌丝获得原生质体 参考方法 一、材料1、供试菌株:凤尾菇(Pleurotus sajor-caju)。2、培养基:PD-马铃薯液体培养基。3、稳渗剂:0.6mol/LMgSO4 溶液或 0.8mol/L 甘露醇溶液。4、酶液:用稳渗剂配置含溶壁酶 15mg/mL 的酶液 3mL。二、方法1、菌丝培养:供试菌株斜面种转入马铃薯液体培养基中,25℃恒温静置培养 6 天。2、菌丝处理:将培养好的菌丝用无菌纯水洗涤 2 次。再用稳渗剂洗涤 1 次,离心去水分。3、酶解:取处理好的菌丝 300mg 至配好的酶液中,摇匀,置 30℃恒温水浴中水解反应1.5h,反应过程间歇振摇(动作应温和)。4、原生质体收集:酶解结束后,酶解液用灭菌脱脂棉过滤。滤液于 2000rpm 离心 10min,收集原生质体。5、原生质体计数:离心完成后弃上清液,沉淀即为原生质体。原生质体用稳渗剂定至 3mL,然后用血球计数法计算原生质体量。
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